به کارگیری روش pcr-elisa با استفاده از ترادف re در تشخیص کمی توکسوپلاسموز تجربی در مدل موشی (rattus norvegicus)

هدف: توکسوپلاسما ممکن است ایجاد آسیب در جنین و از انگل های فرصت طلب در بیماران با ایمنی سرکوب شده است. استفاده از روش های مولکولی برای تشخیص بیماری حساس تر از روش های سرولوژیک است. استفاده از روش pcr-elisa حساسیت و ویژگی بالا، زمان تشخیص توکسوپلاسموزیس نیز سریع تر است. در این پژوهش از روش pcr-elisa با استفاده از قطعه dna re، برای تشخیص توکسوپلاسموزیس به کار رفت. از مزایای این روش حساسیت و اختصاصی بودن و در نهایت تشخیص سریع توکسوپلاسموزیس است. مواد و روش ها: در این مطالعه از روش کمی pcr-elisa برای تشخیص توکسوپلاسموزیس در 15 سر رت استفاده شد. بدین منظور pcr-elisa برای تشخیص سریع توکسوپلاسموزیس راه اندازی شد. در این روش آغازگرهای اولیگونوکلئوتیدی برای هدف گیری ژن re مربوط به تاکی زوئیت به طول 138 جفت باز انتخاب شده و برای تکثیر dna توکسوپلاسما گونده ای، از فرایند pcr و نشاندار کردن همزمان محصول به دست آمده از آن با دیگوکسی ژنین استفاده شد. قطعه نشاندار شده با dig، با پروب اولیگونوکلئوتید بیوتینیله شده اختصاصی دورگه می شود و سپس به استرپتاودین پوشش دار شده در پلیت اضافه می شود. دورگه dna-dna ایجاد شده با اضافه کردن آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین کونژوگه شده با پراکسیداز و با روش کلریمتری قابل شناسایی است. نتایج: با استفاده از سیستم pcr-elisa، ژن re توکسوپلاسما گونده ای در مدت 4 ساعت و با حساسیت بالا مورد شناسایی قرار گرفت. در ضمن آزمایش هایی برای بررسی حساسیت روش به کار برده شده، انجام گرفت و منحنی استاندارد مربوط به حساسیت روش نیز رسم شد. dna توکسوپلاسما پس از 4 ساعت قابل شناسایی است و در این روش عوامل دیگر دخالت ندارند؛ بنابراین فقط این انگل تکثیر و شناسایی می شود. نتیجه گیری: کارایی pcr-elisa ارزیابی شد و ارزیابی ها نشان داد که از مزیت های این روش سریع، حساس، مطمئن و ساده بودن آن است؛ بنابراین می توان از آن به عنوان یک روش تشخیصی استفاده کرد.